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酵母双杂交基本原理

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酵母双杂交是一种可以检测蛋白质-蛋白质相互作用的技术。该技术基于酵母细胞内的两种互补 DNA序列相遇,使两个融合的蛋白质互相作用的原理。酵母双杂交可分为两种基本类型:酵母一杂交和酵母二杂交。

酵母双杂交基本原理

酵母一杂交是通过将目标蛋白质与一个 DNA结合域融合,然后与另一个含有报告基因的 DNA结合域构成一个融合质粒,从而使该结合域的融合蛋白仅在目标蛋白质与蛋白质结合时才能激活报告基因的表达。

酵母二杂交是利用酵母细胞的双杂交体系,在一个被测蛋白质的N端或C端与另一种蛋白质的N端或C端融合后,通过其两部分的相互作用,再使双杂交蛋白进一步激活报告基因的表达。这种技术通常使用筛选背景杂交库来发现交互蛋白。